مطالعه بر روی بیان ژن hmgn3a وsmarcal1 در جنین های حاصل از تخمک های منجمد شده گوسفند (انجماد شیشه ای) به روش real time -pcr

دستیابی به روشی مطمئن در خصوص انجماد تخمک پستانداران، گامی موثر در جهت حفظ باروری در انسان و گونه های جانوری محسوب می شود. از طرفی امکان ابقای منابع ژنتیکی ارزشمند در گونه های اهلی جانوری و وحوش در حال انقراض با بهره برداری از این تکنیک میسر می گردد. انجماد آهسته روشی است که باعث ایجاد کریستال های یخ داخل سلولی و شوک اسمزی در تخمک های منجمد شده می شود.انجماد شیشه ای روشی جایگزین در انجماد بوده که در آن، سلول های در حال انجماد سریع در معرض غلظت بالائی از مواد ضد یخ قرار می گیرند که نتیجه ی آن تشکیل یک ساختمان شبه شیشه ای فاقد کریستال های یخ و کاهش آسیب های حاصل از انجماد می باشد. در حقیقت، غلظت بالای مواد ضد یخ متضمن روند مطلوب انجماد شیشه ای خواهد بود. البته افزایش مواد ضد یخ به دلیل خاصیت سمی آن ها می توانداثرات مضری بر سلول داشته باشد. در مطالعه ی حاضر، ما اثرات انجماد شیشه ای را در رویان های حاصل از تخمک های منجمد شده ی گوسفند، در طی مراحل تکاملی پیش از جایگزینی رویان مورد بررسی قرار دادیم. یکی از تغییرات مهم پیش از جایگزینی، فعال شدن ژنوم رویانی است که متعاقب رخداد های اپی ژنتیک آغاز می شود. در این شرایط، با شروع رونوشت برداری عملا نقش ترانس کریپت های مادری در هدایت رخدادهای سلولی به حداقل خواهد رسید. تغییرات اپی ژنتیک شامل طیف نسبتا گسترده ای از تغییرات اعمال شده در سطح مولکول dna و پروتئین های هسته ای است. در این مطالعه میزان بیان نسبی ژن های hmgn3aو smarcal1 در مراحل رویانی 7-2 سلولی، 16-8 سلولی، مورولا و بلاستوسیست در رویان های حاصل از تخمک منجمد و رویان های حاصل از تخمک غیر منجمد با روش real time pcr ارزیابی شد. نقش این ژن ها در remodelling کروماتین، افزایش رونویسی و نسخه برداری و اصلاح dna در نمو جنین اولیه حائز اهمیت است. همانطور که نتایج نشان می دهند، میزان بیان ژن hmgn3a در گروه رویان های حاصل از تخمک های غیرمنجمد، بیشتر از میزان بیان در رویان های حاصل از تخمک های منجمد بوده و این افزایش در مرحله 16-8 سلولی و مرولا (morulae) معنی دار (p<0.05) بود. میزان بیان smarcal1 در رویان های حاصل از تخمک های منجمد شده بیشتر بوده که این افزایش در مرحله ی بلاستوسیست (blastocyst) از نظر آماری معنی دار (p<0.05) بود. می توان نتیجه گرفت که انجماد سبب کاهش میزان بیان ژن hmgn3a در حالیکه میزان بیان ژن smarcal1 به دنبال انجماد افزایش می یابد.